5° Premio de Investigación CETECE
Autor: Patricia del Amo Forte
Introducción
La necesidad de regular los alimentos de consumo humano y animal elaborados con maíz transgénico Bt ha creado una nueva demanda de métodos de análisis rápidos. En este sentido, el estudio de la fracción proteica mediante métodos ultrarrápidos de cromatografía líquida en fase reversa (RP-HPLC) con columnas de perfusión y monolíticas constituye una alternativa muy interesante a los métodos convencionales de análisis de ADN que son muy costosos y lentos.
Materiales y métodos
Para este estudio se emplearon tres variedades de maíz transgénico Bt con el evento MON-810 (PR33P67, DKC6575, Aristis Bt) y sus correspondientes variedades isogénicas (PR33P66, Tietar, Aristis). De estas muestras, se extrajo la fracción global de proteínas, y las fracciones de albúminas, globulinas, zeínas y glutelinas. El perfil proteico de cada fracción se determinó mediante RP-HPLC con una columna de perfusión y una monolítica. Para obtener los modelos de predicción se prepararon distintas mezclas de harina transgénica e isogénica (0-100%) para cada una de las variedades.
Resultados y discusión
Se encontraron diferencias significativas entre los perfiles proteicos de las líneas transgénicas e isogénicas determinadas mediante RP-HPLC de perfusión y monolítica (Fig. 1).
Tras un análisis discriminante de los datos cromatográficos, se obtuvo un 100% y un 83% de poder de discriminación de las variedades isogénicas y transgénicas separadas mediante RP-HPLC de perfusión y monolítica, respectivamente.
Los menores errores de predicción (2.34-5.25%) del contenido en maíz transgénico, se han alcanzado al aplicar un modelo de regresión lineal multivariante a los datos cromatográficos de perfusión (para Aristis Bt y DKC6575), y a los monolíticos (para la variedad PR33P67).
Conclusiones
- La técnica RP-HPLC de perfusión y monolítica permitió una ultrarrápida separación de los componentes proteicos de las cinco fracciones aisladas.
- El análisis discriminante de los perfiles proteicos permitió la discriminación y diferenciación de las tres líneas transgénicas respecto a sus líneas isogénicas.
- Se han obtenido modelos de predicción del contenido en maíz transgénico en muestras de harina con bajos errores de calibración y predicción.
